微生物學檢查-病原真菌及淺表感染真菌檢查淺表感染真菌概述淺表真菌()主要侵入人體皮膚、毛發和指(趾)甲，寄生于表皮、毛發和指甲板的角質組織中的腐生菌，病因淺表真菌病。淺表感染真菌包括表面感染真菌、皮膚癬菌真菌和皮下組織感染真菌。臨床上最常見的淺表真菌是皮膚癬菌屬皮膚癬菌，包括毛癬菌屬、表皮癬菌屬和小孢子菌屬。皮膚癬菌具有嗜角蛋白特性。其余種類，其中14種可引起人畜感染。紅色毛癬菌在臨床上很常見，又名黃毛癬菌（T.）毛癬菌（T.）一、 標本采集二、直接顯微鏡檢查：頭皮屑+10% KOH甲臜+25% KOH/25% NaOH含5%甘油處理常用濕標本不染色，微生物檢查直接顯微鏡檢查三.分離將標本在70%乙醇或青霉素和鏈霉素中培養，生理鹽水處理5 min，3洗滌，沙氏瓊脂斜面接種25，培養觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。頭皮屑 +10% KOH 甲臜 + 25% KOH/25% NaOH 含 5% 甘油處理常用濕標本不染色，直接顯微鏡檢查微生物學檢查三.在 70% 乙醇或青霉素中分離培養標本和鏈霉素 將混合物用生理鹽水處理5 min，用3洗滌，用沙氏瓊脂斜面接種25，培養觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。頭皮屑 +10% KOH 甲臜 + 25% KOH/25% NaOH 含 5% 甘油處理常用濕標本不染色，直接顯微鏡檢查微生物學檢查三.在 70% 乙醇或青霉素中分離培養標本和鏈霉素 將混合物用生理鹽水處理5 min，用3洗滌，用沙氏瓊脂斜面接種25，培養觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。微生物學檢查的直接顯微鏡檢查三.將標本在70%乙醇或青霉素和鏈霉素中分離培養 混合物用生理鹽水處理5分鐘，用3洗滌，用沙氏瓊脂斜面接種25，培養至觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。微生物學檢查的直接顯微鏡檢查三.將標本在70%乙醇或青霉素和鏈霉素中分離培養 混合物用生理鹽水處理5分鐘，用3洗滌，用沙氏瓊脂斜面接種25，培養至觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。并培養觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。并培養觀察菌落特征。四.其他鑒別測試 穿刺測試 尿素測試 特殊營養需求測試 絮狀表皮癬菌是一種常見的皮膚癬菌，可引起股癬、足癬、體癬、足癬、甲癬等皮膚感染。

絮狀表皮癬菌的生物學特性 用10%的KOH溶液消化皮屑和指甲片，鏡檢見有分隔的菌絲，有斷枝和稀有孢子。轉化為黃色粉末。鏡下可見球拍狀菌絲、橢圓形或巨大棒狀的薄壁大分生孢子，無小分生孢子，老培養物中可見厚膜孢子。我國常見的菌種有小孢子銹菌、石膏小孢子菌和犬小孢子菌。小孢子菌屬 感染皮膚和頭發，引起體癬和頭癬。很少感染指甲。小孢子菌的生物學特性。皮屑和毛發+10%KOH處理鏡檢，皮屑內有分枝和斷裂的菌絲，毛發內嵌有小孢子的鞘包裹著毛干。白色，棕褐色或棕褐色，在沙氏培養基中可以看到粉狀或蓬松的菌落。鏡下可見梳狀、球形或結節狀菌絲、橢圓形小分生孢子和厚壁梭形（紡錘形）大分生孢子。深部感染真菌 深部感染真菌 深部感染真菌是指可侵入深部組織、內臟和全身的真菌，主要包括念珠菌屬、隱球菌屬、曲霉屬、毛霉屬、組織胞漿菌屬和卡氏肺孢子菌等。隱球菌感染較為常見。組織胞漿菌屬雙相真菌，念珠菌屬、曲霉屬、毛霉屬和卡氏肺孢子菌屬機會致病菌，只有在一定條件下才能在體內引起疾病。念珠菌屬念珠菌屬()，俗稱念珠菌。該屬有81種細菌，其中11種對人類有致病性，

臨床意義：可引起女性念珠菌性陰道炎、外陰炎、龜頭念珠菌炎、包皮鵝口瘡等。生物學特性：白色念珠菌呈圓形或橢圓形，直徑3～6μm。革蘭氏陽性，著色不均勻。白色念珠菌在普通瓊脂、血瓊脂和保沙培養基上生長良好病原真菌的鑒定方法，通過出芽繁殖。組織中可見芽生孢子和假菌絲，在玉米粉培養基中可產生假菌絲和厚膜孢子。白色念珠菌微生物檢驗一、標本直檢、分離培養鑒定三、藥敏試驗四、抗體檢測五、動物試驗分離培養及菌落特征鑒定：沙氏標本在培養基上培養 25 或 37 1 至 4 天后，培養基表面可能出現奶油色酵母菌落。顯微鏡檢查顯示假菌絲和芽孢。鑒定試驗：胚管形成試驗（陽性）、厚膜孢子形成試驗、糖同化或發酵試驗、顯色培養基鑒定用念珠菌直接顯微鏡藍陽性念珠菌。分離培養鑒定取標本培養基上形成的深色干燥菌落作為TZC反應菌落進行糖發酵或同化試驗。胚管形成較晚（在血清中超過6小時），不形成厚膜孢子，動物試驗陰性在自然界廣泛分布，也存在于人體表面、口腔和腸道中。生物學特性：組織呈圓形或橢圓形，直，并且具有很強的折射特性。常采用墨陰性染色法，在黑色背景下可檢測到半透明細胞和寬而厚的莢膜，非致病性隱球菌無莢膜。

生物學性狀 酵母型菌，莢膜，不形成假菌絲。非致病性隱球菌無包膜培養特點隱球菌微生物學檢查后顯微鏡檢查：使用患者腦脊液進行墨陰性染色是診斷隱球菌性腦膜炎最簡單、最快的方法。抗原檢測：免疫學方法檢測隱球菌莢膜多糖特異性抗原已成為臨床常規診斷方法，其中最常用的是采乳試驗，簡便快捷。核酸檢測、藥敏試驗、抗體檢測。分離培養：將標本接種于沙氏培養基，致病隱球菌可在25歲和37歲生長，而非致病性隱球菌在37歲時沒有生長。培養2-5天后，觀察菌落的形態特征，取菌落進行顯微鏡檢查，陰性墨汁染色。新型隱球菌微生物鑒定1.酚氧化酶試驗：將細菌接種于左旋多巴檸檬酸鐵和咖啡酸培養基中，培養2-5天。新型隱球菌呈棕黑色菌落。已知的新型隱球菌和白色隱球菌分別用作陽性和陰性對照。2.尿素酶試驗：新型隱球菌產生尿素酶，可將尿素瓊脂培養基中的尿素分解成NH4和CO2，提高培養基的pH值，使培養基由黃色變為粉紅色。白色念珠菌陰性。< @3.糖同化發酵試驗：新型隱球菌能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能發酵糖和區分硝酸鹽。非致病性隱球菌不能同化肌醇。曲霉菌是一種機會致病菌，人體對它有很強的免疫力，只有當人體免疫功能降低時才會致病。曲霉菌可引起呼吸道曲霉菌病；系統性曲霉病；曲霉會產生毒素，導致體內食物中毒；致癌性真菌病 真菌性球肺曲霉病 全部局部發病 依據：器官已有空洞如結核空洞、鼻旁竇、擴張支氣管不侵犯組織，

2.全身性曲霉病重癥原發灶：肺部，消化道少見，多由敗血癥引起<@3.中毒及致癌的人或動物急慢性中毒、神經損傷等組織癌的發生曲霉菌微生物檢查，直接顯微鏡檢查，取痰液等試驗材料涂于載玻片上。顯微鏡下可見分枝的菌絲和較粗的分生孢子頭。小莖上有許多小分生孢子。抗原檢測、抗體檢測、藥敏試驗、皮試分離、培養鑒定：標本接種沙氏瓊脂。在室溫下孵育后，菌落迅速形成，多毛，一般為黃綠色。菌落涂片的顯微鏡檢查顯示特征分子孢子頭和足細胞。根據不同曲霉屬菌種的形態和菌落特征確定菌種。組織細胞質具有高度傳染性，主要侵犯網狀內皮系統，有時通過血行播散侵犯全身各器官。組織胞漿菌是一種雙相真菌，具有典型的菌絲體 25 和酵母類型 37，無論是細胞內還是細胞外。微生物學檢查 涂片染色后應直接鏡檢。痰液等標本：涂片后用甲醇固定10分鐘，然后用染色鏡像皮損、膿液等標本：用20%KOH涂片鏡檢2.抗原檢測，

鑒別：取可疑菌落涂片染色、鏡檢，做脲酶試驗和明膠液化試驗。, PC)，原名卡氏肺孢子蟲。 可寄生于多種動物以及健康人體內。廣泛分布于自然界，如土壤和水中。卡氏肺孢子蟲的傳播途徑主要是空氣傳播，在健康人群中多為無癥狀隱性感染。當宿主免疫力下降時，如長期使用免疫抑制劑、器官移植、腫瘤、艾滋病等，潛伏的卡氏肺孢子菌在患者肺部繁殖擴散，對肺泡上皮細胞造成損傷，導致間質漿細胞肺炎，也稱為卡氏肺孢子菌肺炎 (PCP)。卡氏肺孢子菌的微生物檢查 直接從患者痰液、支氣管肺泡灌洗液或肺活檢組織鏡檢檢查PC是診斷本病的重要依據。常用的染色方法有吉姆薩染色、郭氏環六亞甲基四胺銀染（GMS）和亞甲胺藍染色。可以檢測到包囊和滋養體。抗原檢測、核酸檢測、抗體檢測等 毛霉菌 毛霉菌屬于接合菌門和接合菌綱，共有7科，主要是毛霉菌。麥芽糖培養基、馬鈴薯培養基和沙氏瓊脂培養基在25℃或37℃培養。藥敏試驗、抗體檢測和鑒定是根據毛霉、根霉和菌根的形態特征進行的。

曼尼青霉可引起曼尼青霉病，引起廣泛播散性感染，主要侵入人體網狀內皮系統。 微生物標本的直接檢查：取骨髓涂片、皮膚印記或淋巴結活檢進行 染色和顯微鏡檢查。可見典型的圓形或橢圓形細胞，橫膈膜明顯，常見于巨噬細胞。在細胞中。分離、培養及鑒定：將標本接種于沙氏培養基，25℃培養為青霉期；37、酵母期抗原檢測與鑒別要點：青霉孢子易與莢膜組織胞漿菌的孢子混淆，但前者的孢子常有分隔，從不發芽。鐮刀菌具有很強的生態適應性，廣泛分布于天然土壤、植物地上地下部分或植物碎片中，甚至可以存在于沙漠和北極地區。鐮刀菌引起的人類感染，尤其是免疫功能低下的患者，呈逐年上升趨勢，其發病率和死亡率僅次于白色念珠菌和曲霉菌感染。直接檢查鐮刀菌微生物試驗標本：可見分枝和分離的菌絲，類似于曲霉的微觀特征。栽培鑒定：常用培養基有燕麥培養基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、石竹葉瓊脂、合成瓊脂、氯化鉀培養基和土壤瓊脂。PDA和OA可用于觀察菌落形態和顏色，有時少孢子。KCl培養基可用于觀察分生孢子鏈的形成。土壤介質有利于厚壁孢子的快速形成。新型隱球菌曲霉菌落結構圖 返回煙曲霉 , 光學顯微鏡 X400 , 光學顯微鏡 X200 niger niger, 光學顯微鏡 X200 土曲霉, 光學顯微鏡 X200 構巢曲霉 , 光學顯微鏡 X400 , 光學顯微鏡 X400 , X400 莢膜組織胞漿菌菌落為棉毛狀，鏡檢見細長有隔膜的菌絲，菌絲側面或孢柄大分生孢子上有特殊的圓形菌絲，壁厚，周圍有棘突，排列成齒輪狀。土壤介質有利于厚壁孢子的快速形成。新型隱球菌曲霉菌落結構圖 返回煙曲霉 , 光學顯微鏡 X400 , 光學顯微鏡 X200 niger niger, 光學顯微鏡 X200 土曲霉, 光學顯微鏡 X200 構巢曲霉 , 光學顯微鏡 X400 , 光學顯微鏡 X400 , X400 莢膜組織胞漿菌菌落為棉毛狀，鏡檢見細長有隔膜的菌絲，菌絲側面或孢柄大分生孢子上有特殊的圓形菌絲，壁厚，周圍有棘突，排列成齒輪狀。土壤介質有利于厚壁孢子的快速形成。新型隱球菌曲霉菌落結構圖 返回煙曲霉 , 光學顯微鏡 X400 , 光學顯微鏡 X200 niger niger, 光學顯微鏡 X200 土曲霉, 光學顯微鏡 X200 構巢曲霉 , 光學顯微鏡 X400 , 光學顯微鏡 X400 , X400 莢膜組織胞漿菌菌落為棉毛狀病原真菌的鑒定方法，鏡檢見細長有隔膜的菌絲，菌絲側面或孢柄大分生孢子上有特殊的圓形菌絲，壁厚，周圍有棘突，排列成齒輪狀。

油鏡下血標本可見中性粒細胞或單核細胞呈橢圓形或圓形酵母細胞。卡氏囊腫和滋養體毛霉、青霉、菌絲 青霉菌酵母期皮膚癬菌感染的毛癬菌：菌落呈灰色、紅色、橙色或棕色，表面蓬松、粉狀或蠟狀。大分生孢子細長桿狀，壁薄。菌絲呈螺旋狀、球拍狀、鹿角狀和結節狀。粗桿狀薄壁大分生孢子。菌絲球拍狀小孢子體：菌落呈灰色、橙紅色或棕黃色，有厚壁的大分生孢子，菌絲呈結節狀、梳狀、傾斜的血板。返回胚管形成測試并返回顯色培養。基礎回歸新生隱球菌（負墨漬）